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姜黄抗炎活性细胞试验

检测项目

炎症因子检测:

  • IL-6分泌水平:抑制率≥65%(参照ISO10993-5)
  • TNF-α表达量:浓度梯度IC50值测定
  • COX-2酶活性:抑制率(PGE2生成量下降≥40%)
细胞活性检测:
  • 细胞存活率:MTT法(OD570nm≥0.8)
  • 凋亡率检测:AnnexinV/PI双染(早期凋亡≤15%)
氧化应激指标:
  • ROS清除率:DCFH-DA荧光探针法(清除效率≥70%)
  • SOD酶活力:WST-8法(U/mgprot增幅≥50%)
信号通路分析:
  • NF-κBp65核转位:免疫荧光定量(核质比≤0.3)
  • IκBα磷酸化水平:WesternBlot(灰度值下降≥60%)
基因表达检测:
  • iNOSmRNA:qRT-PCR(ΔΔCt≤-2.0)
  • IL-1β转录水平:SYBRGreen法(表达量下调≥3倍)
代谢产物分析:
  • 姜黄素生物利用度:LC-MS/MS(Cmax≥100ng/mL)
  • 四氢姜黄素含量:HPLC(保留时间3.2±0.1min)
物理特性检测:
  • 溶解度测定:平衡溶解度≥5mg/mL
  • 粒径分布:DLS法(Z-Average≤200nm)
稳定性能测试:
  • 光稳定性:紫外照射12h降解率≤10%
  • 热稳定性:60℃加速试验含量保留≥95%
纯度鉴定:
  • 姜黄素异构体比例:HPLC-DAD(Curcumin≥77%)
  • 重金属残留:Pb≤2ppm(参照GB5009.74)
抗菌协同效应:
  • 最低抑菌浓度:肉汤稀释法(MIC≤128μg/mL)
  • 生物膜抑制:结晶紫染色(OD590nm下降≥50%)

检测范围

1.姜黄根茎原料:检测姜黄素含量(≥3.5%干重)及农残(666≤0.05mg/kg)

2.姜黄油树脂提取物:溶剂残留(乙醇≤500ppm)及挥发物检测

3.姜黄素纳米制剂:包封率(≥85%)及体外释放度(2h释放≤20%)

4.固体分散体粉末:玻璃转化温度(DSC法,Tg≥120℃)

5.脂质体混悬液:磷脂氧化值(PV≤5meq/kg)及Zeta电位(-30mV±5)

6.微胶囊颗粒:崩解时限(≤15min)及水分活度(Aw≤0.35)

7.肠溶软胶囊:溶出度(pH6.8介质2h释放≥80%)

8.姜黄发酵产物:代谢物谱变化(HPLC指纹图谱相似度≥0.95)

9.复合配方制剂:胡椒碱增效作用(相对生物利用度提升≥2倍)

10.细胞培养基添加物:无菌检测(膜过滤法)及内毒素(≤0.25EU/mL)

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-5:2009医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
  • ASTME2526-08纳米颗粒粒度分布测试指南
  • USP〈1225〉药典验证规程
国家标准:
  • GB/T22244-2008保健食品中姜黄素的测定
  • GB4789.15-2016真菌毒素检测
  • GB/T5009.74-2014食品添加剂重金属限量
方法差异说明:ISO10993-5规定LPS刺激浓度为1μg/mL而GB/T16886.5采用10μg/mL;ASTME2526要求动态光散射温度控制25±0.2℃,国标允许±1℃浮动。

检测设备

1.倒置荧光显微镜:OlympusIX83(物镜倍数60×,EMCCD分辨率2048×2048)

2.流式细胞仪:BDFACSAriaIII(激光波长488/640nm,检测通道18个)

3.实时荧光定量PCR仪:ABIQuantStudio7(温控精度±0.1℃,动态范围10^9)

4.多功能酶标仪:TecanInfiniteM200Pro(波长范围230-1000nm,震荡频率1200rpm)

5.高效液相色谱仪:Agilent1260InfinityII(C18柱,检测限0.01μg/mL)

6.激光粒度分析仪:MalvernMastersizer3000(测量范围0.01-3500μm)

7.冷冻干燥机:ChristAlpha1-4LDplus(冷阱温度-85℃,真空度0.01mbar)

8.超高效液相质谱联用仪:WatersXevoTQ-S(离子源ESI±,质量精度1ppm)

9.差示扫描量热仪:METTLERDSC3(温度范围-150~700℃,升温速率0.01-300℃/min)

10.全波长分光光度计:PerkinElmerLambda950(波长精度±0.08nm,杂散光≤0.00007%)

11.生物安全柜:EscoAirstreamAC2-4S1(风速0.45m/s,HEPA过滤效率99.999%)

12.旋转蒸发仪:HeidolphLaborota4000(转速10-280rpm,真空度2mbar)

13.超声波破碎仪:SonicsVCX750(频率20kHz,能量输出750W)

14.二氧化碳培养箱:ThermoScientificHeracell150i(CO2控制±0.1%,温度均一性±0.2℃)

15.凝胶成像系统:Bio-RadChemiDocMP(像素密度3.4MP,动态范围4.8OD)

北京中科光析科学技术研究所【简称:中析研究所】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

姜黄抗炎活性细胞试验
其他检测

中析研究所可进行各种检测分析服务,包括不限于:标准试验,非标检测,分析测试,认证设计,产品验收,质量内控,矢量分析,内部控制,司法鉴定等。可出具合法合规、具有公信力的第三方检测报告。